название продукта А.Лимфоцитарный сепаратор периферической крови человека

спецификация продукции А.200 мл

Условия хранения:А.RT， Избегать света

Срок действия:12 месяцев

Описание продукции:Этот продукт представляет собой стерильный, низкоуровневый градиент плотности для разделения лимфоцитов периферической крови человека. Принцип разделения основан на различиях в плотности клеток крови (плотность эритроцитов и гранулоцитов равна1,090 г/млВлево и налево; Плотность лимфоцитов и моноцитов1.075~1.090 g/mLТромбоциты для1.030~1.035 g/mLЦентрифугирование позволяет клеткам определенной плотности распределяться по соответствующему градиенту плотности, тем самым отделяя лимфоциты от периферической или пуповинной крови человека.

Показатели продукции:плотность1.077±0,001г/млосмотическое давление290~350 мОсм/кг H2Oстерильный0.1μmФильтр

Условия сохранения:Данная продукция чувствительна к свету, должна быть защищена от света при комнатной температуре, срок годности1 В 1997 году. После стерильного вскрытия храните при комнатной температуре.

Шаги действия:1. Взять свежую антикоагулянтную кровь (ЭДТАцитрат натрия или гепарин антикоагулянт) или фибрин крови, с равным объемом цельной крови и тканевого разбавления илиПБСРазбавить цельную кровь.2. Добавьте в центрифужную трубку достаточное количество сепаратора (при разбавлении объем крови меньше3 млКогда, присоединиться3 млРазделительная жидкость; Больше чем равно3 млДобавьте изообъемный сепаратор. Однако их общий объем не может превышать двух третей центробежной трубки, иначе это повлияет на эффект разделения), разбавленная кровь плоско покрыта над уровнем сепаратора, обратите внимание на то, чтобы интерфейс между двумя уровнями был ясен. (Кровь может быть отсосана с помощью соломинки Пастера, а затем тщательно сплющена на сепараторе, так как разница в плотности между ними образует очевидный стратифицированный интерфейс. Если образцы больше, чем пробы в течение более длительного периода времени, то вполне нормально, что эритроциты сгустятся до центрифугирования.)

3. Комнатная температура, горизонтальный ротор500~1000gЦентрифуга20~30минЧем больше объем крови, тем больше центробежная сила.Чем дольше, тем лучше условия разделения нужно нащупать, максимальная скорость центробежного вращения не превышает1200gВ)).4. После центрифугирования появится очевидная стратификация: верхний слой - разбавленный слой плазмы, в середине - прозрачный слой сепаратора, плазма и разделение.Белая мембрана между ионизацией - это слой лимфоцитов, а нижняя часть центробежной трубки - эритроциты и гранулоциты.5. Осторожно впитывайте клетки оболочки.15 млВ чистой центрифуге,10 мл ПБСИли клеточный моющий раствор для промывания клеток белой мембраны.250gЦентрифуга10 минутА.6. Выбросить чистоту,5 мл的ПБСили клетки очищают жидкость от суспензии,250gЦентрифуга10 минутА.7. Повторить шаги68. Бросьте очищение, клетки перегруппируются.

Чистота разделения:Для разделения лимфоцитов используется жидкость, отделяющая лимфоциты человека90%А.

Внимание:А.Перед вскрытием перевернутая смесь, этот сепаратор является стерильным продуктом, чтобы продлить время хранения сепаратора, пожалуйста, откройте в стерильных условиях, чтобы избежать микробного загрязнения.В.При использовании сепаратора всегда должна поддерживаться комнатная температура (18℃~ 25°C) Если температура в помещении низкая, сепаратор может быть подогрет.4Центрифугирование при температуре °C или при более низких температурах может привести к увеличению загрязнения эритроцитов в белой мембране.С.Образцы крови лучше всего брать свежим антикоагулянтом.2 часаВнутри) для поддержания активности лимфоцитов следует избегать замораживания и охлаждения.Д.Разбавить кровь или промыть клетки, не использовать содержаниеКаАМгИонные буферы и питательные жидкости, состав которых приводит к сгущению клеток крови, значительно снижают скорость и чистоту клеток.Е.Некоторые пластиковые изделия (например, полистирол) из - за их электростатического воздействия могут вызвать клеточную подвеску стенок, влияя на эффект разделения.F.вязкость образца крови или разница в температуре может повлиять на эффект разделения, может регулировать количество центробежных оборотов и время центрифугирования, чтобы исследовать наилучшие условия разделения.Г.Чрезмерное поглощение слоя лимфоцитов и слоя сепаратора может привести к высасыванию гранулоцитов на стыке сепаратора, что приведет к увеличению количества смешанных гранулоцитов; Чрезмерное поглощение плазмы может привести к загрязнению белков плазмы и тромбоцитов в лимфоцитах.Х.Если необходимо дополнительно культивировать выделенные клетки, то в процессе сбора и разделения крови обращайте внимание на стерильные операции и избегайте микробного загрязнения.Я.Коэффициенты дискретности клеток и клеточная заряженность в различных удельных сепараторах крови животных различны, и при разработке сепаратора пользователь должен указать долю требуемого сепаратора, род животных и название выделенной клетки.