Этот комплект предназначен только для научных исследований и не предназначен для медицинской диагностики.

Микробы(Микроорганизмы)Оксид - редуктаза(ХАО)

Набор для тестирования ELISA

инструкция по эксплуатации

Принцип обнаружения

В комплекте используется тест на иммуноадсорбцию с использованием двухступенчатого концентрата с двойным къангом (ELISA). Пакеты, предварительно завернутые в тело окислительно - редуктаза гидроксиламина (HAO) kàng, помещаются в микропоры, последовательно добавляются в образцы, стандартные продукты, маркированные HRP для обнаружения тела kàng, после термического размножения и промывки на дне chè. Используя субстрат TMB, TMB преобразуется в синий цвет под катализатором пероксидазы и в окончательный желтый под действием кислоты. Глубина цвета и положительная корреляция оксидационной редуктазы (HAO) в образце. Абсорбция (OD) измеряется с помощью ферментного маркера на длине волны 450 нм для расчета активности образца.

Методы сбора, обработки и хранения образцов

1. Образцы не могут содержать азид натрия (NAN3), поскольку азид натрия (NAN3) является ингибитором пероксидазы хрена (HRP).

2. Извлечение производится как можно раньше после сбора образцов, извлечение осуществляется согласно соответствующей литературе.

Экстракционная жидкость или другой соответствующий образец: 1000 x g центрифуг в течение 20 минут, взятый для обнаружения.

4. Сохранение: Если образец не был своевременно обнаружен после сбора, пожалуйста, упаковывайте его по количеству одного использования, замораживайте и храните при 20°C, избегайте повторного замораживания и таяния, размораживайте при комнатной температуре и убедитесь, что образец равномерно заполнен для разложения и замораживания.

Собственное имущество

1. Ферментометр (450 нм)

2. Высокоточные пробоотборники и головки пистолетов: 0,5 - 10ul, 2 - 20ul, 20 - 200ul, 200 - 1000ul

3. Термотермостат 37°C

Оперативные меры предосторожности

1. Ассортимент хранится при температуре 2–8 °C, используя температурный баланс передней камеры в течение 20 минут. Концентрированный промывочный раствор, извлеченный из холодильника, кристаллизуется, что является нормальным явлением, и нагрев водяной ванны полностью растворяет кристалл wán, прежде чем использовать его.

2.Пластинки, которые не использовались в эксперименте, должны быть немедленно помещены обратно в самогерметизированный мешок и запечатаны (сухие при низких температурах) для сохранения.

Стандартный продукт S0 с концентрацией 0 считается отрицательным контрастом или пустым; В соответствии с инструкцией образец был разбавлен в 5 раз, и конечный результат был умножен на 5, чтобы получить фактическую концентрацию образца.

Тщательно следуйте времени, количеству жидкости и порядку, указанному в инструкции по термодукции.

5. Все жидкие компоненты полностью выравниваются перед использованием.

Состав комплекта

Примечание: Концентрация стандартной продукции (S0 - S5) последовательно: 0, 12,5, 25, 50, 100, 200 U / L

Подготовка реагентов

Разбавление амортизатора стирки 20×: дистиллированная вода разбавляется 1: 20, т.е. 1 часть амортизатора стирки 20× плюс 19 частей дистиллированной воды.

Способ стирки листов

1.Ручная стирка пластин: сбрасывать жидкость в отверстие, каждое отверстие заполняется стиральной жидкостью, после статического размещения 1 мин сбрасывается жидкость в отверстие, высушивается на всасывающей бумаге, так промыть пластину 5 раз.

2. Автоматизированная стиральная машина: в отверстие вводится промывочная жидкость объемом 350 мкл, погружается в 1 мин и промывает пластину 5 раз.

Шаг действия

1. Извлечь требуемую пластину из мешка из алюминиевой фольги после балансировки комнатной температуры в 20 мин, а оставшуюся пластину запечатать обратно на 4 ° C с помощью самогерметичного мешка.

2. Установка стандартных отверстий для продуктов и пробоотборных отверстий, каждая из которых имеет различную концентрацию стандартного продукта 50 мкл;

3. В отверстие для отбора проб добавляется 10 мкл проб, подлежащих измерению, и 40 мкл раствора для разбавления проб; Пустые отверстия не добавляются.

4. В дополнение к пустым отверстиям в стандартное сырьевое отверстие и пробное отверстие добавляется 100 мкл на каждое отверстие, обозначенное пероксидазой хрена (HRP), и отверстие реакции закрывается мембраной, а водяная ванна или термостат при температуре 37°C составляет 60 мин.

5.Выбросить жидкость, высушить на всасывающей бумаге, заполнить каждое отверстие стиральной жидкостью, статически 1 мин, сбросить моющую жидкость, высушить на всасывающей бумаге, так повторить стиральную пластину 5 раз (также можно мыть доску машины).

6. Каждое отверстие добавляется в основание A и B по 50 мкл, а при температуре 37 ° C - 15 мин.

7. На отверстие добавляется концевая жидкость в объеме 50 мкл в течение 15 минут для определения значения OD каждого отверстия на длине волны 450 нм.

Результаты

Нарисуйте стандартную кривую: в рабочем листе Excel стандартная концентрация продукта используется в качестве горизонтальных координат, соответствующая значению OD в качестве вертикальных координат, рисуйте стандартную линейную регрессионную кривую и вычисляйте значения концентрации выборки по кривым уравнениям.

Свойства комплекта

1. Точность: значение R коэффициента корреляции линейной регрессии стандартной продукции с ожидаемой концентрацией, более равное 0,9900.

2. Чувствительность: низкая обнаруженная концентрация зуи менее 1,0 U / L.

Специфичность: не пересекается с другими растворимыми структурными аналогами.

4. Повторяемость: коэффициент вариации внутри и между пластинами составляет менее 15%.

5.Хранение: 2–8°С, светонепроницаемое для влаги хранение.

6. Срок действия: 6 месяцев

Отказ от ответственности

Наборы реагентов предназначены исключительно для исследовательского использования и не должны использоваться в клинических экспериментах или экспериментах на людях, иначе все последствия будут нести экспериментаторы, и наша компания не несет ответственности.

2.Работать строго в соответствии с инструкцией, экспериментатор нарушает инструкцию операции, последствия несет экспериментатор.