Этот комплект предназначен только для научных исследований и не предназначен для медицинской диагностики.

Мыши(Мышь)Фрагмент комплемента фактора I 3b (iC3b)Набор для тестирования ELISA

инструкция по эксплуатации

Принцип обнаружения

В комплекте используется тест на иммуноадсорбцию с использованием двухступенчатого концентрата с двойным къангом (ELISA). Пакеты, предварительно завернутые в комплемент I - фактора фрагмент 3b (iC3b) kàng, помещаются в микроотверстия, последовательно добавляются в образцы, стандартные изделия, HRP маркированные обнаруженные тела káng, которые подвергаются термическому размножению и промывке на дне chè. Используя субстрат TMB, TMB преобразуется в синий цвет под катализатором пероксидазы и в окончательный желтый под действием кислоты. Глубина цвета положительно коррелирует с фрагментом комплемента I - фактора 3b (iC3b) в образце. Абсорбция (OD) измеряется с помощью энзимометра на длине волны 450 нм для расчета концентрации проб.

Методы сбора, обработки и хранения образцов

Сыворотка крови: Используя пробирки, не содержащие термогенов и эндотоксинов, во время операции избегая каких - либо клеточных стимуляций, после сбора крови 3000 вращений центрифуги в течение 10 минут быстро и тщательно отделяют сыворотку от эритроцитов.

2. Плазма крови: EDTA, лимонат или гепарин - антикоагулянт. 3000 поворотов центрифуги на 30 минут.

Клеточная жидкость: 3000 вращающихся центрифуг в течение 10 минут для удаления частиц и полимеров.

4. Организационная симметрия: Добавление ткани в соответствующее количество физиологического раствора для измельчения. 3000 оборотов центрифуги в течение 10 минут.

5.Сохранение: Если образец не был своевременно проверен после сбора, пожалуйста, упаковывайте его по одноразовому использованию, замораживайте на 20°C, избегайте повторного замораживания и таяния, размораживайте при комнатной температуре и убедитесь, что образец равномерно заполнен для разложения и замораживания.

Собственное имущество

1. Ферментометр (450 нм)

2. Высокоточные пробоотборники и головки пистолетов: 0,5 - 10ul, 2 - 20ul, 20 - 200ul, 200 - 1000ul

3. Термотермостат 37°C

Оперативные меры предосторожности

1. Ассортимент хранится при температуре 2–8 °C, используя температурный баланс передней камеры в течение 20 минут. Концентрированный промывочный раствор, извлеченный из холодильника, кристаллизуется, что является нормальным явлением, и нагрев водяной ванны полностью растворяет кристалл wán, прежде чем использовать его.

2.Пластинки, которые не использовались в эксперименте, должны быть немедленно помещены обратно в самогерметизированный мешок и запечатаны (сухие при низких температурах) для сохранения.

Стандартный продукт S0 с концентрацией 0 считается отрицательным контрастом или пустым; В соответствии с инструкцией образец был разбавлен в 5 раз, и конечный результат был умножен на 5, чтобы получить фактическую концентрацию образца.

Тщательно следуйте времени, количеству жидкости и порядку, указанному в инструкции по термодукции.

5. Все жидкие компоненты полностью выравниваются перед использованием.

Состав комплекта

Примечание: Концентрация стандартной продукции (S0 - S5) последовательно: 0, 12,5, 25, 50, 100, 200 нг / мл

Подготовка реагентов

Разбавление амортизатора стирки 20×: дистиллированная вода разбавляется 1: 20, т.е. 1 часть амортизатора стирки 20× плюс 19 частей дистиллированной воды.

Способ стирки листов

1.Ручная стирка пластин: сбрасывать жидкость в отверстие, каждое отверстие заполняется стиральной жидкостью, после статического размещения в течение 1 минуты сбрасывается жидкость в отверстие, высушивается на всасывающей бумаге, так стирать пластину 5 раз.

2. Автоматизированная стиральная машина: в отверстие вводится промывочная жидкость объемом 350 мкл, погружается в 1 мин и промывает пластину 5 раз.

Шаг действия

1. Извлечь требуемую пластину из мешка из алюминиевой фольги после балансировки комнатной температуры в 20 мин, а оставшуюся пластину запечатать обратно на 4 ° C с помощью самогерметичного мешка.

2. Установка стандартных отверстий для продуктов и пробоотборных отверстий, каждая из которых имеет различную концентрацию стандартного продукта 50 мкл;

3. В отверстие для отбора проб добавляется 10 мкл проб, подлежащих измерению, и 40 мкл раствора для разбавления проб; Пустые отверстия не добавляются.

4. В дополнение к пустым отверстиям в стандартное сырьевое отверстие и пробное отверстие добавляется 100 мкл на каждое отверстие, обозначенное пероксидазой хрена (HRP), и отверстие реакции закрывается мембраной, а водяная ванна или термостат при температуре 37°C составляет 60 мин.

5.Выбросить жидкость, высушить на всасывающей бумаге, заполнить каждое отверстие стиральной жидкостью, статически 1 мин, сбросить моющую жидкость, высушить на всасывающей бумаге, так повторить стиральную пластину 5 раз (также можно мыть доску машины).

6. Каждое отверстие добавляется в основание A и B по 50 мкл, а при температуре 37 ° C - 15 мин.

7. На отверстие добавляется концевая жидкость в объеме 50 мкл в течение 15 минут для определения значения OD каждого отверстия на длине волны 450 нм.

Результаты

Нарисуйте стандартную кривую: в рабочем листе Excel стандартная концентрация продукта используется в качестве горизонтальных координат, соответствующая значению OD в качестве вертикальных координат, рисуйте стандартную линейную регрессионную кривую и вычисляйте значения концентрации выборки по кривым уравнениям.

Свойства комплекта

1. Точность: значение R коэффициента корреляции линейной регрессии стандартной продукции с ожидаемой концентрацией, более равное 0,9900.

2. Чувствительность: низкая обнаруженная концентрация зуи менее 1,0 нг / мл.

Специфичность: не пересекается с другими растворимыми структурными аналогами.

4. Повторяемость: коэффициент вариации внутри и между пластинами составляет менее 15%.

5.Хранение: 2–8°С, светонепроницаемое для влаги хранение.

6. Срок действия: 6 месяцев

Отказ от ответственности

Наборы реагентов предназначены исключительно для исследовательского использования и не должны использоваться в клинических экспериментах или экспериментах на людях, иначе все последствия будут нести экспериментаторы, и наша компания не несет ответственности.

2.Работать строго в соответствии с инструкцией, экспериментатор нарушает инструкцию операции, последствия несет экспериментатор.