5637 Раковые клетки мочевого пузыря

Продукция компании предназначена только для научных исследований и не может быть использована для клинической диагностики!

Клеточная линия / штамм:

Клеточная линия (Cell Line): протокультурный танец становится клеточной линией после передачи из поколения в поколение, состоящей из линии клеточной родословной (Lineage of Cells), которая ранее существовала в протогенных культурах.

Клеточные штаммы (Cell Strain): штаммы, имеющие особые свойства или маркеры, называемые клеточными штаммами, получены из протокультур или клеточных линий путем селекции или клонирования. Особые свойства или признаки клеточного штамма должны сохраняться на протяжении всего периода культивирования. Если вы не можете продолжать передачу или алгебраически ограничены, это называется конечный штамм клеток (finitecell strain); При непрерывной передаче называется непрерывный штамм клеток (continuous cell strain). Для опухолевых клеток человека, культивируемых вне организма более полугода, рост стабилен и непрерывно передается, можно назвать непрерывным штаммом или линией.

(i) Воспитание первого поколения

Первичная культура, также известная как протокультура, является первой культурой, проведенной непосредственно из клеток, тканей и органов, извлеченных из организма. После того, как клетки были выведены из культуры транскрипции (Subculture), они больше не называются культурами первого поколения, а называются клеточными линиями.

(2) Клеточная линия

Культивы первого поколения начинают впервые передавать клетки после культивирования, называемые клеточными линиями. Если клеточная линия имеет ограниченную продолжительность жизни, она называется ограниченной линией клеток (Finite Cell Line). Клеточная линия, которая обладает неограниченной способностью к размножению, чтобы выжить, называется непрерывной или бесконечной линией клеток (Infinite Cell Line). Большинство бесконечных клеточных линий были гетерогенными, с гетероциклическими нуклеотидами, некоторые из которых, возможно, стали злокачественными клетками и, следовательно, по существу являются трансформированными клеточными линиями. Некоторые неограниченные клеточные линии имеют только бессмертие (или бессмертие), но сохраняют канцерогенность ингибирования воздействия и безинъекционных прививок; Некоторые не только имеют бессмертие, гетерогенные прививки также имеют опухолевую природу, что указывает на злокачественность. Эти две неограниченные клеточные линии разных свойств часто не очень строги в применении этих терминов в отечественной и зарубежной литературе. Для концептуальной ясности в этой книге используются неограниченные клеточные линии со злокачественными! • Злокачественная трансформация клеточной линии! Слово ± может быть более уместным. Для тех линий, которые являются бессмертными и не злокачественными, достаточно использовать бесконечные или трансформированные линии клеток. В настоящее время циркулирующие NIH3T3, Rat - 1, 10T1 / 2 относятся к этим типам клеток.

Операции клеточной культуры:

1) Реанимационные клетки: замороженные трубки, содержащие 1 мл клеточной суспензии, быстро размораживаются и размораживаются в водяной ванне при температуре 37°C, плюс 4 мл питательной среды смешиваются равномерно. Центрифугирование в течение 3 мин при 1000 рpm, сбрасывание очищающей жидкости, добавление 1 - 2 мл питательной среды после дутья равномерно. Затем все клеточные суспензии добавляются в бутылки с умеренным количеством питательной среды для культивирования на ночь (или добавляют клеточную суспензию в чашку 6 см, добавляя около 4 мл питательной среды, культивируя ночь). На следующий день поменяйте жидкость и проверьте плотность клеток.

2) Клеточная транскрипция: если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру транскрипции. a、 Откажитесь от культивирования верхней очистки, промывайте клетки PBS 1 - 2 раза без ионов кальция и магния.

b、 Добавьте 1 мл пищеварительного раствора (0,25% Trypsin - 0.53 мМ EDTA) в питательную бутылку, так что пищеварительная жидкость проникает во все клетки, выбрасывает пищеварительную жидкость, помещает питательную бутылку в инкубатор 37°C для переваривания 1 - 3 мин (в зависимости от пищеварения клетки), а затем наблюдайте пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округлена и выпадает, быстро возвращайтесь на стол, после нескольких ударов по питательной бутылке добавьте 2 - 3 мл питательной среды, чтобы прекратить пищеварение. После мягкого удара в стерильную центробежную трубку, 1000 rpm центрифуга 5 мин, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно. А.

c、 Клеточная суспензия делится в пропорции 1: 2 в новую чашку или бутылку, содержащую 8 мл питательной среды, и культивируется в инкубаторе.

3) Замораживание клеток: Когда клетки растут в хорошем состоянии, может проводиться замораживание клеток. В качестве примера можно привести следующие бутылки T25;

a、 Собирайте клетки, помещайте их в стерильную центрифужную трубку, центрифугируйте 4 минуты в условиях 1000 rpm, выбрасывайте очищающую жидкость, промывайте ее PBS снова, выбрасывайте PBS, проводя подсчет клеток.

b、 В зависимости от количества клеток добавьте бесссывороточный клеточный замораживающий раствор, так что плотность клетки 5×106 ~ 1×107 / мл, мягко перемешайте, каждая замороженная трубка замораживает 1 мл клеточной суспензии, обратите внимание, что замороженная трубка хорошо идентифицирована.

c、 Трубки для замораживания помещаются в холодильник с температурой 80°C, а через 24 часа передаются на хранение в жидком азоте. Запишите расположение замороженной трубки, чтобы получить ее в следующий раз.

Продукция, которую компания продает: