Микроскопические эндотелиальные клетки легких человека

Основные свойства клеток.

Название клетки:Микроскопические эндотелиальные клетки легких человека

Источник ткани: легочная ткань

Род происхождения: человек

Технические характеристики: 5 × 105cells / T25 Клеточные бутылки

Описание клетки:Микроскопические эндотелиальные клетки легких человекаВыделение из легочной ткани; Легкие - это органы дыхания организма, расположенные в грудной клетке, каждый слева и справа, покрытые сердцем. Легкие имеют доли, два слева и три справа, всего пять листьев. Легочная транслегочная система (относится к трахее, бронхам и т. Д.) соединена с горлом, носом, поэтому горло называется воротами легких, нос - внелегочный трюк. Микроскопические эндотелиальные клетки активно участвуют в ряде физиологических и воспалительных реакций, включая регенерацию, развитие и заживление ран. Клетки имеют форму челнока или многоугольника и расположены в виде булыжника или брусчатки после образования одного слоя. Микроваскулярные эндотелиальные клетки легких образуют полуселективный барьер, который имеет большое значение для газообмена легких, регулируя поток жидкостей и растворимых веществ между кровью и интерстициалами легких.

Условия упаковки: PLL (0,1 мг / мл), желатин (0,1%)

Культурная среда: содержит FBS, добавки для роста, Penicillin, Streptomycin и т.д.

Частота смены жидкости: каждые 2 - 3 дня

Характеристики роста: стенки

Клеточная форма: эндотелиальный образец

Характеристики передачи: может передаваться 2 - 3 поколения

Соотношение поколений: 1: 2

Пищеварительная жидкость: 0,25%

Условия культивирования: газовая фаза: воздух, 95%; CO2，5%

II. Методы использования:

Микроскопические эндотелиальные клетки легких человекаЭто тип клеток, прикрепленных к стенке, клеточная форма представляет собой образец эндотелиальных клеток, в стандартном рабочем процессе Технического отдела, клетки могут передаваться в течение 2 - 3 поколений; Рекомендуется провести соответствующий эксперимент как можно скорее после получения клетки.

После того, как клиент получает клетку, выполните операцию следующим образом.

1. Извлечь бутылку для культивирования клеток T25, продезинфицировать корпус бутылки 75% спирта, снять герметичную мембрану и поместить в клетку для культивирования клеток с 37°C, 5% CO2, насыщенной влажностью в статическом состоянии 3 - 4h для стабилизации клеточного состояния.

2. Переварение стенных клеток

1) высасывает питательную среду из бутылки для культивирования клеток T25 и промывает клетки PBS один раз;

2) Добавление 0,25% пищеварительного раствора от 1 мл до T25 Культурная бутылка, легкий поворот питательной бутылки до пищеварительного раствора, покрывающего дно всей питательной бутылки, высасывание избыточной пищеварительной жидкости, 37 ° C теплая ванна 1 - 3 мин; Наблюдение под перевернутым микроскопом, после того, как клетка отступает и становится круглой, добавьте 5 мл питательной среды, чтобы прекратить пищеварение;

3) мягко дуть соломинкой, чтобы перемешать, вакцинировать T25 в пропорции передачи, а затем добавить свежую питательную среду до 5 мл, поместить статическую культуру в клеточный инкубатор с 37°C, 5% CO2, насыщенной влажностью;

4) После того, как клетка прикреплена к стенке, культивировать наблюдение; Свежие питательные среды затем заменяются по частоте обмена жидкости.

3. Клетки получают отслоение

1) Сбор всех клеточных суспензий, 1000rpm, центробежных 5 мин, удержание осаждения;

2) Добавление 0,25% пищеварительной жидкости 0,5 мл в центрифужную трубку, повторное осаждение суспензии, помещено при 37°C пищеварения 3 мин (или 4°C холодильник статического 5 - 7 мин); После пищеварения добавьте 5 мл питательной среды в центрифужную трубку, чтобы остановить пищеварение;

3) После 1000rpm, центрифуг 5min, отбрасывает верхнюю очистку, с 5 мл питательной среды для повторного осаждения, вакцинируется в новой бутылке;

4) После того, как клетка прикреплена к стенке, культивировать наблюдение; После этого в соответствии с частотой обмена жидкости заменяется свежая среда (подогрев 37°C).

5) Стенные клетки в оригинальной бутылке обрабатываются в соответствии с нормальным пищеварением.

4. Клеточные эксперименты

Из - за особенностей стенки протоклеток, стенки протоклеток после переваривания передаются в другие экспериментальные сосуды (например, стеклянные ползунки, питательные пластины, конфокальные сосуды и т. Д.), экспериментальные сосуды должны быть упакованы, чтобы повысить клеточную стенку, чтобы избежать клеточного воздействия на эксперимент из - за неправильной вставки; Условия упаковки часто выбирают коллаген I хвоста крысы (2 - 5 мкг / см2), полилизин PLL (0,1 мг / мл), желатин (0,1%), в зависимости от типа клетки. Взвешенные / полувзвешенные клетки не должны быть упакованы.

Продукция, которую компания продает:

Клеточная культура Внимание:

Внимание к культуре протоклеток. Протогенная клеточная культура является очень важной экспериментальной технологией, которая хорошо разбирается в этих мерах предосторожности, чтобы сделать ваш эксперимент более плавным.

Во - первых, стерильные операции являются ключевыми. Обязательно сохраняйте чистую операционную среду и избегайте заражения бактериями или плесенью, иначе эксперимент потерпит неудачу.

Во - вторых, важно также выбрать подходящую питательную среду и сыворотку. Потребности различных клеток в питательных средах и сыворотке различны, поэтому выбор подходящей среды и сыворотки зависит от типа клетки.

Кроме того, они являются компонентами клеточной культуры. Свежие приготовления также должны регулярно пополняться в процессе хранения.

В процессе клеточной культуры статическая культура также очень важна. Клеткам требуется определенное время, чтобы адаптироваться к новой среде после разделения пищеварения, поэтому избегайте частого извлечения бутылок для наблюдения в течение этого периода.

Кроме того, время переваривания также необходимо правильно контролировать. Как правило, пищеварение до невооруженного глаза, чтобы увидеть крошечные тканевые частицы достаточно, слишком длительное время переваривания может привести к увеличению повреждения клеток, влияя на выживаемость клеточной культуры.

Наконец, для некоторых конкретных типов клеток может потребоваться добавление некоторых специальных факторов роста для содействия росту и размножению клеток. Однако следует отметить, что стоимость этих факторов роста обычно выше.