Мышиный миоглобин (MYO / MB) Набор реактивов ELISA Операционный процесс:

(1) в каждое отверстие для проб, подлежащих измерению, добавляется 100 мк1 для проб, каждый из которых имеет три параллельных отверстия; Установите два отрицательных контрольных отверстия, каждое из которых не обработано

Группа клеточного крекинга 100 мк1; Также имеется пустое контрольное отверстие, в которое добавляется чистый клеточный крекинг 100 мк1.

(2) Ферментная маркерная пластина помещается 4°C, пакет ночевает.

(3) Моющие пластины: реактивный раствор в всасывающем отверстии, перемытый стиральным раствором (после наполнения отверстия стиральной жидкостью, сбрасывается), после чего моющая жидкость заполняется пластиной

Отверстие, замачивание 1 - 2 минуты, периодическое раскачивание. После сброса жидкости из отверстия высушите ее на всасывающей бумаге. Повторите стирку 3 - 4 раза.

(4) Отрицательные контрольные отверстия добавляют PBS50 мк1 на отверстие, а отверстия для образцов и пустые отверстия добавляют 1: 500 разбавленных антиантичеловеческих антител к рабочей жидкости 50 мк1.

(5) Ферментная маркерная пластина помещается во влажную коробку инкубатора 37°C, инкубация 60 мин.

(6) Мыть доски, то же (4).

(7) Добавьте 1: 5000 разбавленных HRP на отверстие - помеченный козий антиантиантитело рабочий раствор 100 мк1.

(8) Ферментная маркерная пластина помещается во влажную коробку инкубатора 37°C, инкубация 60 мин.

(9) Мыть доски, то же (4).

(10) На отверстие добавляется TMB - цветная жидкость 100 мк1, слегка перемешивается в 10 с и реагирует в темноте при 37°C 15 - 20 мин.

(11) На отверстие добавляется 100 мк12mo1 / LH2S04 для прекращения реакции.

(12) Измеряйте значения поглощения света V1 и 630 нм V2, соответственно, с окончательным значением 0D как разницу между ними (V1 - v2), чтобы уменьшить количество, получаемое из тары

Световые помехи, вызванные царапинами или отпечатками пальцев.

(13) Обработка данных: значение S / N рассчитывается после получения значения OD образца (S) и отрицательного контрольного (N). S / N > 2.1 является критерием положительного решения.