Способы промывки реактивов Rat IL - 2sR Elisa:

Автоматизированная стиральная машина: 350 мкл стиральной жидкости на отверстие с интервалом впрыска и всасывания 60 секунд. Стирать доску 5 раз.

2.Ручная стирка пластины: сбрасывать жидкость в отверстие, высушивать ее на чистой впитывающей бумаге, добавлять стиральную жидкость 350 мкл на отверстие, погружать в течение 1 - 2 минут, отсасывать (не касаться стенки) или сбрасывать жидкость из ферментной пластины, высушивать на толстой впитывающей бумаге. Стирать доску 5 раз.

До начала эксперимента каждый реактив должен быть сбалансирован до комнатной температуры; При приготовлении реагента или образца необходимо полностью перемешать и, насколько это возможно, избегать пузырьков.

1. Добавление проб: отдельные пустые отверстия, стандартные отверстия, отверстия для проб, подлежащих измерению. Пустое отверстие плюс образец разбавленного раствора 100 мкл, остаточное отверстие плюс стандартный продукт или образец, подлежащий измерению 100 мкл, обратите внимание, что не должно быть пузырьков, добавьте образец к нижней части пластины фермента, старайтесь не касаться стенки отверстия, мягко встряхните и перемешайте. Нанесите мембрану на ферментную пластину, инкубацию при температуре 37°C в течение 2 часов. Для обеспечения эффективности результатов каждого эксперимента используйте новый стандартный раствор.

Выбросьте жидкость, высушите, добавьте в каждое отверстие рабочий раствор Detection Ab 100 мкл (приготовленный в течение 15 минут до использования), энзимный маркер плюс покрытие, температура 37°C 1 час.

3. Выбросить жидкость из отверстия, сбрасывать высушить, мыть доску 3 раза, каждый раз погружать 1 - 2 минуты, около 350 мкл / отверстие, бросать и слегка хлопать на впитывающей бумаге, чтобы высушить жидкость в отверстии.

Сухой 4. Добавьте рабочую жидкость HRP Conjugate (приготовленную в течение первых 15 минут использования) 100 мкл на отверстие, а также покрытие, температура 37°C 1 час.

5.Выбросить жидкость внутри отверстия, сбрасывать высушить, промыть пластину 5 раз, метод синхронной вспышки 3.

6. На отверстие добавляется 100 мкл донного раствора, ферментная маркерная пластина плюс покрытие 37 ° C для предотвращения фотоинкубации в течение примерно 15 минут (сокращение или удлинение в зависимости от фактической окраски, но не более 30 минут, при наличии очевидного градиента в стандартном отверстии).

7. На отверстие добавляется жидкость для прекращения 50 мкл, чтобы остановить реакцию, когда синий вертикально поворачивает желтый. Порядок добавления завершающей жидкости должен быть, насколько это возможно, таким же, как и порядок добавления субстратной жидкости.

Немедленно измерить плотность света (OD) каждого отверстия с помощью ферментативного маркера на длине волны 450 нм. Следует заранее включить источник питания энзимометра, подогревательный прибор, установить программу обнаружения.

9. После завершения эксперимента неиспользованный реактив помещается обратно в холодильник при предписанной температуре хранения до конца срока действия.