YNP - Y Мыши нейропептид ELISA Шаги действия:

1. Разбавление и взятие образцов стандартного продукта: 10 отверстий стандартного продукта на пластине ферментативного пакета, 100 мкл стандартного продукта в первом и втором отверстиях di, затем 50 мкл стандартного разбавления в первом и втором отверстиях di, смешивание; Затем из одного отверстия di и второго отверстия берётся по 100 мкл, добавляется к третьему и четвертому отверстиям, затем в третьем и четвертом отверстиях добавляется стандартная разбавленная жидкость 50 мкл, смешивается; Затем в третьем и четвертом отверстиях сначала берется 50 мкл, затем 50 мкл, соответственно, 50 мкл, добавляется в седьмое и восьмое отверстия, затем в седьмое и восьмое отверстия добавляется стандартная разбавленная жидкость 50 мкл, затем смешивается из седьмого и восьмого отверстий в пятое и шестое отверстия, а затем в пятое и шестое отверстия добавляется стандартная разбавленная жидкость 50ul, смешивается равномерно; После смешивания из пятого и шестого отверстий по 50 мкл добавляется в девятое и десятое отверстия, затем в девятое десятое отверстие добавляется стандартная разбавленная жидкость по 50 мкл, после смешивания из девятого десятого отверстия удаляется по 50 мкл. (После разбавления количество проб для каждого отверстия составляет 50 мкл, концентрация 180 нг / л, 120 нг / л, 60 нг / л, 30 нг /, 15 нг / л, соответственно).

2. Добавление проб: отдельные пустые отверстия (пустые контрольные отверстия без образца и реагента ферментативного маркера, остальные шаги одинаковы), отверстия для проб, подлежащих измерению. В отверстие для проб, подлежащее измерению на панели ферментативного пакета, добавляется разбавленная жидкость образца в объеме 40 мкл, а затем еще 10 мкл для проб, подлежащих измерению (окончательная степень разбавления образца в 5 раз). Добавьте образец к нижней части отверстия ферментативной пластины, старайтесь не касаться стенки отверстия, мягко встряхните и перемешайте.

3. Термофертильность: Закрытие пластины мембранной пленкой при температуре 37°C в течение 30 минут.

4. Распределение: после разбавления 30 - кратного (20 - кратного по 48Т) концентрата очищающего раствора в дистиллированной воде в 30 - кратном (20 - кратного по 48Т) объеме производится резервирование.

5.Мытье: Осторожно снять пленку уплотнительной пластины, сбросить жидкость, сбрасывать, каждое отверстие заполнить моющей жидкостью, после статического размещения 30 секунд отбросить, так повторить 5 раз, отсушить.

6. Добавление ферментов: на отверстие добавляется 50 мкл реагента ферментативного маркера, за исключением пустого отверстия.

7.Термофертильность: операции те же 3.

8. Мойка: Операция та же 5.

9. Цвет: сначала добавьте цветопроявитель A50 мкл на отверстие, затем добавьте цветопроявитель B50 мкл, мягкое сотрясение перемешивается, 37 ° C избегает яркости в течение 15 минут.

10. Конец: на отверстие добавляется жидкость для прекращения 50 мкл, что прекращает реакцию (в это время синий вертикально поворачивает желтый цвет).

11. Измерение: Последовательное измерение абсорбции (OD) отверстий в пустом кондиционере с нулевым значением и длиной волны 450 нм. Измерение должно производиться через 15 минут после добавления жидкости для остановки.