Обычно мы можем использоватьЭЛИСАТестированные образцы имеют несколько типов, таких как сыворотка крови, плазма, моча, клеточная культура или тканевая симметрия, и различные типы тестовых образцов имеют разные методы предварительной обработки. Правильная обработка образцов гарантируетЭЛИСА* Шаги к правильности и точности тестирования, ниже кратко описывается метод обработки различных типов образцов.

1、 сыворотка

Сыворотка Zui обычно используетсяЭЛИСАОдин тип проверенных образцов, обработка также относительно проста.

Отбор образцов крови в пробирке или центробежной трубке без термогена и эндотоксина и размещение пробирки или центрифуги при комнатной температуре2Часы или4°C ночует, чтобы сыворотка была выделена. (Наклонение пробирки или центрифуги позволяет увеличить поперечное сечение уровня жидкости и увеличить выделение сыворотки.)4℃1000ХgЦентрифугирование20минутаТщательно собирайте и очищайте. Рекомендуется класть сыворотку в несколько частей,-20°C или-80Сохранить при температуре Цельсия, чтобы избежать повторного замораживания и таяния.

Во время сбора крови следует избегать растворения крови, так как при расщеплении эритроцитов высвобождаются вещества с пероксидазной активностью.HRP& ОтметитьЭЛИСАВ тесте может быть неспецифический цвет, что приводит к неточности теста. Также следует избегать бактериального загрязнения, так как бактерии могут содержать эндогенныеHRPЭто приводит к ложному положительному тесту.

2、 Плазма крови

Отбор образцов крови с использованием кровеносных сосудов или центрифуг, содержащих антикоагулянты.30 минутвнутри4℃ 1000ХgЦентрифугирование15 минутВзять чистую, то есть плазму. Разобрать несколько частей,-20°C или-80Сохранить при температуре Цельсия, чтобы избежать повторного замораживания и таяния. Избегайте использования гемолитических или гиперлипидных образцов.

Часто используемые антикоагулянты являютсяЭДТАГепарин натрия и цитрат натрия и т. Д. При тестировании также следует внимательно прочитать инструкции по набору реагентов, чтобы проверить, есть ли в наборе особые требования к конденсаторам.

3、 Клеточная культура очищается

Возьмите клеточную культуру, чтобы очистить ее от центрифуг,1000ХgЦентрифугирование20 минутУдалите фрагменты клеток и примеси,-20°C или-80Сохранить при температуре Цельсия, чтобы избежать повторного замораживания и таяния.

4、 Клеточный крекинг

1) Высасывайте питательную среду из доски, переваривайте клетки с помощью фермента поджелудочной железы и выдувайте клетки с доски с соответствующим количеством питательной среды. Взвешенные клетки могут быть опущены.

2) Сбор клеточной суспензии,1000ХgЦентрифугирование10 минутВыбросить питательную среду, предварительно охладитьПБСУмывание3Восемь пунктов.

3) Добавьте умеренное количество предварительного охлаждения.ПБСЛибо клеточный крекинг (добавьте ингибитор протеазы перед использованием) суспензия клеток. обычно6Требуется количество ячеек в одном отверстии.150 ~ 250мкл ПБСТяжелая подвеска.

4) Поместить образец-20°C или-80При температуре Цельсия, чтобы образец был заморожен, а затем при комнатной температуре разморозил образец, многократно замораживался и оттаивался несколько раз, так что клетки полностью расщепляются. Образцы также могут быть подвергнуты ультразвуковому дроблению для достижения цели крекинга.

5) 4℃10000 х гЦентрифугирование10 минутУдалите фрагменты клеток и очистите их,-20°C или-80Сохранить при температуре Цельсия, чтобы избежать повторного замораживания и таяния.

5Структурный раствор

1) Используйте образцы тканейПБС (0,01)М, РН 7,4)Промыть, смыть остаточную кровь или примеси с поверхности ткани.

2) Взвешивать блоки ткани, после записи разрезать, фрагменты должны быть как можно меньше, чтобы облегчить более полное равномерное растворение

3) Добавьте ткань к предварительно охлажденной.ПБС(Добавьте ингибиторы протеазы перед использованием) Амметризируйте раствор и помещайте его на лед или в ледяную ванну. (Обычно по весу ткани:ПБСобъем= 1: 9пропорциональной симметрии, например,1 гОбразец ткани соответствует9 мл的ПБСКонкретный объем может быть соответствующим образом скорректирован в соответствии с экспериментальными потребностями, после обнаружения концентрация образца должна быть умножена на соответствующий разбавленный множитель)

4) Сосать раствор в центрифужную трубу,4℃5000 х гЦентрифугирование5~10 минутВзять и очистить,-20°C или-80Сохранить при температуре Цельсия, чтобы избежать повторного замораживания и таяния.

6、 Биологические образцы других жидкостей, таких как моча и слюна

1000 х гЦентрифугирование20 минутИ, взяв чистку, можно обнаружить.

В целом, потому чтоЭЛИСАСодержание растворимого белка может быть обнаружено только, поэтому необходимо убедиться, что все образцы являются очищенными жидкостями, а осадки или суспензии должны быть удалены центрифугой.

Чтобы убедиться в точности теста, сохраните-20°C или-80При температуре C образец находитсяОт 1 до 6Тестирование в течение месяца;4При температуре Цельсия образец должен быть1Проверка проводится в течение недели.

Кроме того, необходимо обеспечить, чтобы образец не содержалNaN₃Потому чтоNaN₃Будет подавляться.HRPАктивность, которая приводит к ложноотрицательным результатам.