Набор ELISAТест на иммуноадсорбцию с использованием двухступенчатого сэндвич - метода с двойным антителом (ELISA). В пакеты, предварительно завернутые в антитела к кокковой черви (SF), помещаются в микропоры, последовательно добавляются образцы, стандартные продукты, обнаруженные антитела, отмеченные HRP, после термоэкстракции и промывки. Используя субстрат TMB, TMB преобразуется в синий цвет под катализатором пероксидазы и превращается в * конечный желтый под действием кислоты. Глубина цвета положительно коррелирует с наличием в образце кокковых червей (SF). Абсорбция (OD) измеряется с помощью энзимометра на длине волны 450 нм для расчета концентрации проб.

Этапы работы контрольного комплекта ELISA:

1. Равновесие от комнатной температурыПосле 20 мин из алюминиевого фольгового мешка извлекается необходимая пластина, а остальная пластина запечатана обратно на 4 ° C с помощью самогерметичного мешка.

2. Установка стандартных отверстий для продуктов и пробоотборных отверстий, каждая из которых имеет различную концентрацию стандартного продукта 50 мкл;

3. В отверстие для отбора проб добавляется 10 мкл проб, подлежащих измерению, и 40 мкл раствора для разбавления проб; Пустые отверстия не добавляются.

4. В дополнение к пустым отверстиям в стандартные отверстия для продуктов и отверстия для проб добавляется 100 мкл на каждое отверстие для обнаружения антител, маркированных пероксидазой хрена (HRP), и отверстие для реакции запечатывается мембраной, а водяная ванна или термостат с температурой 37°C нагревается на 60 мин.

5.Выбросить жидкость, высушить на всасывающей бумаге, заполнить каждое отверстие стиральной жидкостью, статически 1 мин, сбросить моющую жидкость, высушить на всасывающей бумаге, так повторить стиральную пластину 5 раз (также можно мыть доску машины).

6. Каждое отверстие добавляется в основание A и B по 50 мкл, а при температуре 37 ° C - 15 мин.

7. На отверстие добавляется концевая жидкость в объеме 50 мкл в течение 15 минут для определения значения OD каждого отверстия на длине волны 450 нм.

Обработка и хранение наборов для тестирования ELISA:

Возможность примененияНабор для тестирования ELISA имеет много видов образцов, есть сыворотка, плазма, верхняя очистка клеток, клеточный крекинг, моча, суставной синус, спинномозговая жидкость, альвеолярное орошение промывки, тканевая симметрия различных тканей; Способы сбора и обработки различны. Ниже перечислены способы сбора, обработки и сохранения проб, собранных в наборе ELISA.