Спецификация 48T инсулин гипергликецин (GC) Человеческий реактив

Спецификация 48T инсулин гипергликецин (GC) Человеческий реактив
Введение
Гиогликулин (GC) также известен как инсулин или антиинсулин или инсулин B. Это гормон, который сопровождает инсулин, выделяемый альфа - клетками инсулина в инсулине позвоночных. Борьба с инсулином повышает уровень сахара в крови. Гиогликулин активирует фосфатазу клеток печени через систему cAMP - PK, ускоряя разложение гликогена. Сахарная гетерогенность усиливается, потому что гормоны ускоряют поступление аминокислот в клетки печени и активируют ферменты, связанные с гетерогенными процессами сахара. Гиогликулин также активирует липаза, способствует разложению жира, в то же время усиливает окисление жирных кислот, увеличивая образование кетонов. В этом наборе для человека GC иммунологический тест представляет собой трехэтапный твердофазный концентрат ELISA, используемый для измерения GC человека в цитоплазме, сыворотке крови и плазме крови. Результаты, полученные с помощью GC - физического лица, показывают линейные кривые, параллельные стандартным кривым, полученным с использованием рекомбинантного стандартного продукта. Эти результаты показывают, что этот набор может быть использован для определения относительной массы природного человека GC.

Принцип обнаружения

В комплекте используются двойные антитела.Технология ELISA: Захватывающий антитело пакет помещается на энзимную пластину, образец захвата и стандартный продукт, подлежащий измерению GC, после инкубационной очистки, затем добавляется маркированное тестовое антитело для очистки после инкубации, образуется иммунный комплекс « Захватывающее антитело - антиген - обнаруживающее антитело », затем добавляется пероксидаза хрена, связанная со стрептомицином, для инкубации, после инкубации очищается, а затем добавляется выраженная жидкость TMB, если образец должен быть синим, добавляется прекращающая реакция. Все ингредиенты, которые были свободны во время тестирования, были смыты, и значение OD было измерено с помощью ферментометра на 450 нм, глубина цвета была пропорциональна содержанию подлежащего измерению вещества в образце, а концентрация GC в образце была рассчитана путем построения стандартной кривой.

Оперативные элементы

1. При смешивании белковых растворов всегда следует избегать пузырьков. Во избежание перекрестного загрязнения при добавлении каждого стандартного изделия, образца и реагента следует заменить головку детонатора. Кроме того, каждый реактив должен использоваться отдельно в контейнере.

Обеспечить непрерывное добавление реагента в отверстие пластины. Чтобы обеспечить точный результат, на стадии инкубации необходимо склеить хорошую мембрану.

При использовании автоматической стиральной машины точность измерений может быть повышена путем добавления 30 - секундного периода погружения после добавления моющего буфера или вращения пластины на 180 градусов между этапами стирки.

4. Цветовой проявитель должен оставаться бесцветным до тех пор, пока его не добавят в пластину. Обеспечить, чтобы проявитель не подвергался воздействию света. Цветовой состав должен быть бесцветным и синим.

Конечный раствор следует добавлять в пластину в том же порядке, что и цветопроявитель. После добавления концевой жидкости цвет, образующийся в отверстии, изменится с синего на желтый. Зеленые отверстия указывают на то, что концевая жидкость не полностью смешивается с основным раствором.

Другие необходимые материалы

1. Ферментный маркер, содержащий 450 нм измеренной длины волны и более совершенную коррекционную длину волны 600 - 680 нм;

2. Мигратор и головка пистолета;

3. Дистиллированная или деионизированная вода;

4. шкала 100 - 1000 мл;

5. стиральная машина для бутылок, ружей или автоматических микропористых пластин;

6. Генераторы с микропористой пластиной на горизонтальной орбите, способные поддерживать скорость 500 ± 50 rpm;

7. пробирки для разбавления стандартных продуктов и образцов.

спецификация48T Инсулин гипергликецин (GC) Человеческий реактив
Меры предосторожности

1. Конечный раствор, предоставляемый в настоящем наборе реактивов, представляет собой раствор разреженной серной кислоты, обладающий определенной коррозионной способностью и должен эксплуатироваться с осторожностью.

Некоторые компоненты в этом наборе содержат консерванты, которые могут вызвать аллергические реакции на коже, и маску следует носить, чтобы избежать вдыхания тумана.

Отличитель цвета B может вызывать раздражение кожи, глаз и дыхательных путей, и маску следует носить, чтобы избежать вдыхания тумана.

4. Носить защитные перчатки, средства защиты глаз и лица, мыть руки после обработки.

Приготовьтесь.

Перед использованием все реагенты помещаются в равновесие комнатной температуры примерно на 30 минут.

2. Конфигурация скруббера / разбавленного раствора: если скрубберка / разбавленный раствор (20×) имеет кристаллическое выделение, кристалл нагревается при 37°C и полностью растворяется. Разбавить дистиллированной водой 1: 20 (например: 1 мл концентрированного скруббера с добавлением 19 мл дистиллированной воды)

Стандартная конфигурация

Извлечь стандартный товар из комплекта, приготовитьСемь пробирок, сперва40 нг/млСтандартные (200 мкл) по мере необходимости разбавляется до 2000 пг / мл с помощью разбавленного раствора 1× (например, стандартный исходный раствор 50 мкл + 950 мкл разбавленного раствора 1× для получения стандартной концентрации 2000 пг / мл 1000 мкл), затем в шесть пробирок добавляется раствор 1× разбавленного раствора 500 мкл, и в этих шести отдельных пробирках стандартный продукт 2000пг / мл разбавляется в два раза по сравнению с 6 градиентами, в результате чего производится стандартное вещество с семью концентрациями, в порядке:2000pg/mL, 1000pg/mL, 500pg/mL, 250pg/mL, 125pg/mL, 62.5pg/mL, 31.25pg/mL,Из стандартного раствора концентрата.500 мкл стандартного продукта в следующую пробирку, мягко выдувается и смешивается, и так далее, чтобы сделать удвоение стандартного продукта (как показано на рисунке), разбавленный раствор 1× используется в качестве стандартного продукта с нулевой концентрацией (0pg / ml)

Расчет результатов

Расчет средней пористости стандартных изделий и образцовЗначение OD вычитается из значения OD пустого отверстия в качестве коррекционного значения. Концентрация как горизонтальные координаты, значение OD как вертикальные координаты, стандартная кривая для четырехпараметрической логической функции, нарисованная на бумаге координат (значение пустой группы при построении диаграммы), или стандартная кривая, созданная с помощью компьютерного программного обеспечения, способного генерировать четыре параметрических логических (4 - P) кривых. Если значения OD в образце превышают верхний предел стандартной кривой, они должны быть соответствующим образом измерены после разбавления и умножены на соответствующее кратное разбавления при расчете концентрации образца.А.

Примерные данные

Приведенные ниже данные и кривые предназначены только для справки, и экспериментаторы должны установить стандартные кривые на основе своих собственных экспериментальных данных.

Стандартная кривая, показанная на этом рисунке, используется только в качестве примера, и расчет результатов должен основываться на стандартной кривой, нарисованной на том же испытательном стандарте
чувствительность

После тестирования образцов чувствительность к обнаружению этого комплекта составляет15,63 пг/мл.

Специфичность

Набор реагентов идентифицирует естественных и рекомбинантных людей.ГКА.

Другие родственные белки готовятся в разбавленном буфере50ng/mL， И измерить перекрестную реактивность. Заметных перекрестных реакций не наблюдалось.

Резюме этапов эксперимента
1.Добавить стандартные изделия и образцы, 37°C светозащитная реакция 1.5h, промывание 3 раза.

2. Плюс тест на антитела,37°C Светоизоляция 1h, промывание 4 раза.

3. Ферментные соединения,Светоизоляция при температуре 37°C в течение 30 минут, стирка 4 раз.

4. Добавление проявительной жидкости, светозащитная реакция 37°C в течение 15 минут.

5. Добавьте жидкость для прекращения, чтобы дать показания в течение 5 минут

человекГиогликулин(ГК)Набор реагентов используется для количественного обнаружения клеток, культивирующих верхнюю очистку, сыворотку крови, людей в плазме крови.ГКПеред использованием данного продукта необходимо полностью прочитать инструкцию.ЧеловекНабор ELISA предназначен только для научных исследований и не предназначен для других диагностических целей.А.