Набор для обнаружения клеточной пролиферации и клеточной токсичности МТС

Китайское название:Набор для обнаружения клеточной пролиферации и клеточной токсичности МТС

Обсуждение MTS Cell Proliferation and Cytotoxicity Detection Kit

Технические характеристики продукции: 500 раз
Номер товара: BJ - 01X6321

МТС - это новое соединение метилазида, которое, как и МТТ, является производным тетраазола. МТС может генерировать коричнево - желтый растворимый в воде метиламин путем разложения митохондриальной дегидрогеназы в живых клетках, измеряя спектральное поглощение метиламина, а затем и размножение клеток.

Правила работы клеточной культуры:
I. Подготовка питательных сред и условий замораживания культур:
1) Подготовка питательной среды F - 12K; Качественная сыворотка коровьего скота для плода, 10%; Двойное сопротивление, 1%.
2) условия культивирования: газовая фаза: воздух, 95%; Углекислыйгаз, 5%. Температура: 37°C, влажность инкубатора 70% - 80%.
3) Замороженная жидкость: 90% сыворотки, 10% DMSO, в настоящее время используется существующее распределение.
II. Клеточная обработка:
1) Реанимационные клетки: замороженные трубки, содержащие 1 мл клеточной суспензии, быстро помещаются в водяную ванну при температуре 37°C (поверхность воды ниже крышки криогенной трубки), размораживаются и размораживаются, перемещаются в заранее подготовленную 15 - миллиметровую центробежную трубку, содержащую 4 мл питательной среды, и смешиваются равномерно. Центрифугирование в течение 4 минут в условиях 1000RPM, удаление очищающей жидкости, добавление 1 мл питательной среды и выдувание. Затем все клеточные суспензии помещаются в бутылку с 5 мл питательной среды для культивирования на ночь. На следующий день поменяйте жидкость и проверьте плотность клеток.
2) Клеточная транскрипция: если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру транскрипции.

Методы клеточной культуры:
1. Клеточная передача: она передается, когда плотность клеток достигает 80 - 90%
(1) Выбросить культивирование верхней очистки, промыть 1 - 2 раза PBS или физиологическим раствором;
б) добавить 2ml0.25% (T25 флакон), чтобы покрыть всю бутылку или чашку Петри, крышку, помещенную в инкубатор для пищеварения;
(3) После 1 - 2 мин, под микроскопом, чтобы наблюдать клетки, если большинство клеток отступает и небольшое количество клеток выпадает, мягко дуть, чтобы подтвердить пищеварение после добавления * питательной среды для прекращения пищеварения; Если клетка все еще прикреплена к стенке, поместите ее обратно в инкубатор, чтобы продолжать переваривать до тех пор, пока ее можно мягко надуть;
(4) центрифугирование на 4 мин в условиях около 1000 RPM клеточной суспензии;
(5) После повторного подвешивания свежей питательной средой добавляйте в бутылку или чашку Петри, бутылку T25 плюс 6 - 8 мл питательной среды;
Взвешенные клетки собираются непосредственно центробежным путем, а клетки осаждаются и перегружаются и распределяются в новые бутылки для культивирования.
2.Восстановление клеток:
(1) Замораживающая трубка быстро раскачивается и тает при температуре 37°C, время около 1 минуты, добавляя 4 - 5 мл питательной среды, смешанной.
б) центрифугирование 4 мин в условиях около 1000 RPM, оставление очищения, плюс 1 - 2 мл питательной среды, выдувается равномерно, клеточная суспензия добавляется в питательную бутылку, добавляется соответствующее количество питательной среды.
Замораживание клеток: замораживание клеток до тех пор, пока они не вырастут в хорошем состоянии
(1) Выбросить культуру Shangqing, промыть 1 - 2 раза PBS или физиологическим соляным раствором, добавить 1 мл 0,25% (T25 бутылок)
б) после 1 - 2 мин, под микроскопом, чтобы наблюдать за клетками, большинство клеток отступают и небольшое количество клеток выпадает, мягко дуть, чтобы подтвердить пищеварение после добавления * питательной среды для прекращения пищеварения;
(3) центрифугирование 4 мин в условиях около 1000 RPM клеточной суспензии, удаление, плюс 1 мл замороженной суспензии;
(4) Поместите трубку замораживания в программный охлаждающий ящик, поместите ее в холодильник с температурой 80°C и переведите трубку замораживания в резервуар для хранения жидкого азота через 4 часа.

TM3 (Интертестостеронные клетки мышей) 5×106cells / флакон ×2

TSCCA (клетки рака чешуи языка человека) 5×106cells / бутылка ×2

U - 2 OS (клетки остеома человека) 5×106cells / бутылка ×2

U251 (клетки глиомы человека) 5×106cells / бутылка ×2

U - 87 MG (клетки глиомы человека) 5×106cells / бутылка ×2

U - 937 (клетки лимфомы человеческой ткани) 5×106cells / бутылка ×2

V79 (клетки легких хомяка) 5×106cells / бутылка ×2

VCaP (раковые клетки предстательной железы человека) 5×106cells / бутылка ×2

Vero (клетки почек африканской зеленой обезьяны) 5×106cells / бутылка ×2

WI - 38 (эмбриональные клетки легких человека) 5×106cells / бутылка ×2

WISH (клетки амниотической оболочки человека) 5×106cells / бутылка ×2

Y1 (Y - 1) (клетки коры надпочечников мышей) 5×106cells / бутылка ×2

YAC - 1 (клетки лимфомы мышей) 5×106cells / бутылка ×2

ZR - 75 - 1 (клетки рака молочной железы человека) 5×106cells / бутылка ×2

ZR - 75 - 30 (клетки рака молочной железы человека) 5×106cells / бутылка ×2

16HBE (эпителиальные клетки бронхов человека) 5×106cells / бутылка ×2

801 - D (клетки макроклеточного рака легких человека) 5×106cells / бутылка ×2

A2 (аденоидные кистозные раковые клетки человека) 5×106cells / флакон ×2

A - 427 (клетки рака легких человека) 5×106cells / бутылка ×2

A - 498 (клетки рака почек человека) 5×106cells / бутылка ×2

A875 (клетки меланомы человека) 5×106cells / бутылка ×2

Легочный альфа - / бета - гидролизный белок 3 антитела

Трифосфат аденозин - связка

Трифосфат аденозин - связка

Антитела ADCK1

ацил - связывающий структурный домен белка 4 антитела

Альфа / бета - гидролиз 4 антитела

Антитела ADCK2

Дегидрогеназа ацетальдегида 16 Домашние антитела A1

Связанные молекулы IgG - подобные доменные белки 3 антитела

Этанол - дегидрогеназа 1 антитела

Антитела дегидразы дельта - аминоацетилпропионовой кислоты

Боковой склероз

Антитела к альфа - 2

Антитела ACCSL

Антитела метилпротеина

Бета - амилоидный прекурсор

Антитела к астрокинетину

Систематическая красная волчанка, связанная с белками TREX1 антитела

Фосфатированная системная красная волчанка

Фосфорилированные системные белки, связанные с красной волчанкой TREX1 антитела

Набор для обнаружения клеточной пролиферации и клеточной токсичности МТСГоловно - ассоциированный протеиновый комплекс AP - 2 мкЦП 1 антитела

Фосфорилированные соединения, связанные с белковым комплексом AP - 2 мкЦП 1 антитела

Мембранный слизистый белок 7 антитела

правила эксплуатации
В 96 - пористой пластине к клетке добавляется 100 мкл / отверстие, обычно в эксперименте по размножению клеток добавляется 100 мкл 2000 клеток на отверстие, в эксперименте по цитотоксичности добавляется 100 мкл 5000 - 10 000 клеток на отверстие (количество клеток, используемых в каждом отверстии, зависит от размера клетки, скорости размножения клетки и т. Д.). Поместите 37 ° C 5% CO2 клеточные инкубаторы для культивирования в течение 24 часов.
2, 2. Добавьте соответствующие концентрации 0 - 10 мкл испытуемого соединения.
Инкубируйте 96 - пористую пластину при температуре 37°C, в клеточном инкубаторе, содержащем 5% воздуха CO2 и 100% влажности в нужное время.
Разбавить 5×МТТ разбавленным раствором в раствор 1×МТТ.
В каждом отверстии добавляется 50 мкл раствора 1×МТТ, который высиживается при температуре 37°C в течение 4 часов, что приводит к восстановлению МТТ до метилена.
Высасывайте очищающую жидкость, добавляйте 150 мкл DMSO на отверстие, чтобы растворить америций, размахивая его плоским качающимся станком.
Ферментометр обнаруживает плотность света в каждом отверстии на длине волны 570 нм (без 570 нм можно использовать 560 - 600 нм).
8 Анализ результатов
a、 Показатель выживаемости клеток: вычитает значение OD для каждого испытательного отверстия из фонового значения OD (* культивируется MTT, без клеток) или значения OD для пустого лекарственного отверстия (* культивируется различная степень разбавления испытуемого препарата плюс MTT, без клеток), среднее значение OD для каждого повторяющегося отверстия ± SD. Показатель выживаемости клеток показан в% T / C, значение OD для дозированной клетки - это значение, а значение OD для контрольной клетки - это значение C. Клеточная выживаемость% = (адъювантные клетки OD / контрольные клетки OD) × 100
b、 Концентрация препарата при определении T / C = 50% (IC50) и T / C = 10% (IC90)