HEP - 53.4 Клетки рака печени у мышей

Основная информация

Название клеткиА.HEP - 53.4 Клетки рака печени у мышей

Клеточные псевдонимыА.HEP-53.4 ; 53.4; Клетки рака печени у мышей

Источник клетокА.Германия

Идентификация клетокА.Проверка STR прошла.

Клеточная формаА.Эпителиальные клетки, рост на стенках

питательная группаА.DMEM (с NaHCO3 1,5 г / л) (BasMed - AW - 013) + FBS 10% + P / S1%

Условия культивированияА.Газовая фаза: воздух, 95%; Углекислыйгаз, 5%. Температура: 37 градусов Цельсия, влажность инкубатора 70% - 80%

Условия замораживанияА.Хранение жидкого азота без сывороточной заморозки

Клеточный фонА.Первичный рак печени у мышей C57BL / 6J, клетки печени которых точно представляют рак печени и обеспечивают ценные модели для изучения этого типа рака печени, синонимы HEP - 53.4 и 53.4, которые легко идентифицируют и перекрестно цитируют, что является серьезной проблемой для здоровья, эти клетки могут точно исследовать свои молекулярные пути, клеточные взаимодействия и терапевтические стратегии, которые возникли в Mus musculus (мыши), обеспечивая соответствующую модельную систему для понимания и разработки методов лечения рака печени.

Применение клетокА.Только для научных целей

Клеточный период: спот, около 1 недели

Меры предосторожности

1. Обычное пищеварение собирает клеточную центрифугу.

2. После центрифугирования удалите внутреннюю очистку центробежной трубки, добавьте 1 мл тяжелых подвесных клеток, смешанных, рекомендуется мягко встряхнуть или мягко вдуть клетки, поместить в инкубатор для переваривания клеток, а затем переварить около 1 мин.

3. После переваривания мягко вдувайте клеточную суспензию с помощью переносного пистолета, чтобы рассеять клеточные скопления, быстро добавляя 3 - 5 мл сывороточной питательной среды, смешанной, чтобы прекратить пищеварение, центробежное удаление.

Добавьте около 5 мл клеток к соответствующей питательной среде, смешанной пропорционально в бутылку / чашку Петри.

Под микроскопом, чтобы увидеть, является ли клетка равномерно распределенной одноклеточной, при небольшом количестве небольших скоплений клеток не нужно переваривать, чтобы они прикреплялись к стенке, пока рост клетки не стабилизируется, а затем рассеивали клетки.

Отправка при комнатной температуре

После получения T25 бутылок стерилизации, а затем поместить инкубатор в покое через 2 - 3 часа после наблюдения плотности и состояния фотографий 2 - 3 обратной связи для продажи, плотность достижения стандарта может быть передана. Предыдущий коэффициент передачи 1: 2, и так далее, когда он снова вырастает после передачи, рекомендуется заморозить одну из целых бутылок в 1 мл замороженной трубки, другая бутылка продолжает передавать, повторно заморозить 2 - 3, прежде чем расширить эксперимент, чтобы предотвратить чрезвычайную ситуацию, вызванную разрушением.

Отправка сухого льдаОбычные клеточные отгрузочные замороженные трубки 2, восстановление 1, другой резерв, первое восстановление не удалось восстановить в строгом соответствии с требованиями производителя восстановления второй, ни одно восстановление успеха не было немедленно сохранено восстановление фотографии, чтобы сообщить нам.

HEP - 53.4 Клетки рака печени у мышей

Стенографические клетки

1. Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.

2. Добавьте 0,25% (w / v) 0,53 мм EDTA в культурную бутылку (T25 бутылок 1 - 2 мл, T75 бутылок 2 - 3 мл), поместите в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут (трудно перевариваемые клетки могут надлежащим образом продлить время переваривания), а затем посмотрите на пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округляется и выпадает, быстро возьмите операционный стол, после нескольких ударов по бутылке добавьте 3 - 4 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, чтобы прекратить пищеварение.

3. Аккуратно выровнять и высосать, центрифугировать 3 - 5 мин в условиях 1000 RPM, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно. Клеточная суспензия делится на новую чашку Петри T25 / 6cm в соотношении 1: 2, добавляя 6 - 8 мл новой среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 - 1: 5.

Замораживание клеток: После получения клетки рекомендуется заморозить партию клеточных семян для последующего экспериментального использования при культивировании первых трех поколений.

Транспортные питательные среды (оросительные среды) больше не могут использоваться для культивирования клеток, замените их новыми питательными средами, подготовленными в соответствии с условиями культивирования клеток в инструкции.

Взвешенные клетки

Клетки, растущие во взвешенном состоянии, могут поддерживать состояние роста клеток, добавляя питательную среду в бутылку для культивирования, а плотность клеток, как правило, поддерживается на уровне 1×10 ⁵ ~ 1×10 ⁶ / мл (различные требования к плотности клеток различны), чтобы поддерживать нормальный рост клеток. Если требуется флакон, клеточная суспензия может быть собрана в центробежной трубке 1000 rpm, центрифуга 5 мин, отброшена в верхнюю очистку, после добавления 1 - 2 мл питательной жидкости после повторного взвешивания, клеточная суспензия делится на новую бутылку T25 в соотношении 1: 2, добавляется 6 - 8 мл новой питательной среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клетки, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 - 1: 4.

Форма перевозки

Низкая температура: 1 мл замороженной трубки упаковка сухого льда транспортировка, после получения 80 градусов холодильник после хранения на ночь в жидкий азот или прямое восстановление, если вы обнаружите, что сухой лед испаряется чистым, крышка замороженной трубки сброшена, повреждена и клетки загрязнены, пожалуйста, немедленно свяжитесь с нами.

Постоянная температура: T25 бутылок для восстановления выживших клеток при комнатной температуре, отправленных после получения в соответствии с методом обработки после приема клеток.

Биологическая безопасность

Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать в рамках вторичной станции биобезопасности, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитные маски при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.

Особое внимание

Клетка хорошо растет в среде DMEM (с содержанием 1,5 г / LNAHCO3), и большинство DMEM содержат более высокие концентрации NaHCO3 (3,7 г / L), которые требуют повышения концентрации CO2 (7% - 10%) при культивировании клеток в среде DMEM (3,7 г / L NAHCO3).