Клеточная линия MOC1

Основная информация

Название клетки:Клеточная линия MOC1

T150 Колбы: 07 - 200 - 64

T75 Колбы: 10 - 126 - 37

Холодильник: 03 - 374 - 059

Фильтр 45um: 09 - 754 - 21

Линия инертности: MOC1,22

Линия агрессии: MOC2

IMDM: sh30228.02 Хамс

Питательная смесь F10 - F12: sh30026.01 Сыворотка плода крупного рогатого скота, характеристики - морское клонирование

Каталог / номер партии: sh30071.03 / AWK24001

Фильтр для фильтрующих бутылок 1L: 09 - 761 - 108

Каталог научных реактивов Номер инсулина: I6634 - 50 мг

Номер каталога EMD микропористых реагентов: Коэффициент роста эпидермиса (EGF), рекомбинантный человек: 01 - 107

Клеточная линия MOC1

Оттепляющая клеточная линия

Перед размораживанием добавьте к T150 21 мл питательной среды IMDM MOC (10 мл к T75, если вы хотите разморозить до T75).2. Извлечь жидкий азот из замороженной бутылки и распылить флакон, содержащий 70% алкоголя, для очистки.

Поместите нижнюю часть холодильника в водяную ванну при температуре 37 градусов по Цельсию (не позволяя крышке соприкасаться с водой, чтобы избежать загрязнения), пока не всплывет небольшой кусочек льда.

4. Опыляйте морозильную бутылку снова ETOH и положите ее на капот. В 1 мл клеток добавляется 1 мл пипетки с питательным раствором, и эти 2 мл добавляются в T150, который уже содержит питательную среду (так что общий объем T150 составляет 22 мл).

Взять несколько питательных сред в колбе T150, промыть замороженную бутылку, а затем поставить планшет, чтобы убедиться, что все оставшиеся клетки остаются в замороженной бутылке.

Замороженные клетки
Сбор клеток из T150

Повернуть в частицы в 15 - миллиметровой конической трубке (1000 RPM x 5 минут)

3. Сброс очищающей жидкости

Нажмите 15 мл конической трубки, тяжелые суспензионные клетки

Добавьте 1.5 мл питательной среды IMDM MOC - линии для восстановления клеток в питательной среде - удерживайте лед

Медленное добавление 1,5 мл замороженной среды при входе трубы во лед (производство замороженной среды - 20% DMSO в линейной среде IMDM MOC. Пример: Запасы 20 мл - добавьте 16 мл IMDM MOC - линии питательной среды и 4 мл DMSO. Фильтр шприца, используя фильтр UM

От 1 мл до 3 морозильных бутылок на порцию

Хранить при температуре - 80 градусов Цельсия не более 2 недель

Поместить в раствор жидкого азота в течение 1 - 2 недель

Примечание:При необходимости его можно увеличить до 2 мл IMDM и 2 мл замороженной среды для хранения в 4 флаконах. Кроме того, лучше всего считать клетки перед замораживанием и записывать их на флаконы.