moc1 / moc2 Рак чешуйчатых клеток полости рта у мышей

Основная информация

Название клеткиА.moc1 / moc2 Рак чешуйчатых клеток полости рта у мышей

Клеточная линияА.C57BL/6 Cxcr3-/-

Источник клетокА.За границей

Идентификация клетокА.Проверка STR прошла.

Клеточная формаА.Лимфоидный полигональный образец, стенка + суспензионный рост

СредаА.DMEM (с NaHCO3 1,5 г / L) (BasMed - AW - 013) + FBS 10% + P / S1% 500 ML питательная среда: IMDM: F10 / F12 = 2: 1313 мл: 157 мл питательная среда + FBS10% (50 мл) + 2,5 мг / 500 мл инсулина + 20ug / 500 мл + 2.5ug / 500 мл EGF + P / S 1% двойной резистентный 1%, 1%.

Условия культивированияА.Газовая фаза: воздух, 95%; Углекислыйгаз, 5%. Температура: 37 градусов Цельсия, влажность инкубатора 70% - 80%

Клеточный фонА.Цитобластный рак полости рта (OSCC) является видимым подмножеством рака головы и шеи, который является шестью наиболее распространенными видами рака. Основным фактором риска развития OSCC является воздействие канцерогенов, которое отличает эту подгруппу рака головы и шеи от рака головы и шеи, вызванного вирусом опухоли человека. Несмотря на прогресс в области тестирования, хирургии, химиотерапии и лучевой терапии, прогнозы OSCC остаются стабильными на протяжении десятилетий. Кроме того, на момент постановки диагноза около двух третей пациентов с OSCC имели локальные поздние стадии заболевания, что привело к увеличению заболеваемости и смертности.

Применение клеток: только для научных исследований

Меры предосторожности

1. Клеточная активность MOC1 особенно высока, скорость добавленной стоимости очень быстра, не рекомендуется слишком большая плотность передачи, но выберите разреженную точку пересадки, эквивалентную длине около 80% при передаче, трудно переварить, рекомендуется добавить 0,25% EDTA после входа, чтобы полностью смешать все клетки контактируют, поместить в питательный ящик для пищеварения, время около 3 - 4 минут после извлечения

2.На боковой стороне культивирующей посуды, чтобы сделать хлопок, чтобы помочь клетке сбросить, процесс хлопка длится около 2 минут, прежде чем большая часть клеток будет сброшена, если доля выпадения еще не велика, вы также можете снова положить обратно в инкубатор, чтобы продолжить переваривание в течение 1 - 2 минут после того, как снова вынуть, чтобы хлопать, ожидая, когда 80 - 90% клеток упадут, прежде чем прекратить пищеварение, центробежная тяжелая подвеска, а затем перезаложить бутылку, равномерно распределена.

3. Клетки MOC2 не особенно прочны в стенообразных и обычных клетках. Цикл умножения также не так быстр, как MOC1. Обработка с использованием обычных методов пищеварения.

Отправка при комнатной температуре

После получения T25 бутылок стерилизации, а затем поместить инкубатор в покое через 2 - 3 часа после наблюдения плотности и состояния фотографий 2 - 3 обратной связи для продажи, плотность достижения стандарта может быть передана. Предыдущий коэффициент передачи 1: 2, и так далее, когда он снова вырастает после передачи, рекомендуется заморозить одну из целых бутылок в 1 мл замороженной трубки, другая бутылка продолжает передавать, повторно заморозить 2 - 3, прежде чем расширить эксперимент, чтобы предотвратить чрезвычайную ситуацию, вызванную разрушением.

Отправка сухого льдаОбычные клеточные отгрузочные замороженные трубки 2, восстановление 1, другой резерв, первое восстановление не удалось восстановить в строгом соответствии с требованиями производителя восстановления второй, ни одно восстановление успеха не было немедленно сохранено восстановление фотографии, чтобы сообщить нам.

Стенографические клетки

1. Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.

2. Добавьте 0,25% (w / v) - 0,53 мм EDTA в культурную бутылку (T25 бутылок 1 - 2 мл, T75 бутылок 2 - 3 мл), поместите в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут (трудно перевариваемые клетки могут надлежащим образом продлить время переваривания), затем посмотрите на пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округляется и выпадает, быстро заберите операционный стол, после нескольких ударов по бутылке добавьте 3 - 4 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, чтобы прекратить пищеварение.

3. Аккуратно выровнять и высосать, центрифугировать 3 - 5 мин в условиях 1000 RPM, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно. Клеточная суспензия делится на новую чашку Петри T25 / 6cm в соотношении 1: 2, добавляя 6 - 8 мл новой среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 - 1: 5.

Замораживание клеток: После получения клетки рекомендуется заморозить партию клеточных семян для последующего экспериментального использования при культивировании первых трех поколений.

Транспортные питательные среды (оросительные среды) больше не могут использоваться для культивирования клеток, замените их новыми питательными средами, подготовленными в соответствии с условиями культивирования клеток в инструкции.

Взвешенные клетки

Клетки, растущие во взвешенном состоянии, могут поддерживать состояние роста клеток, добавляя питательную среду в бутылку для культивирования, а плотность клеток, как правило, поддерживается на уровне 1×10 ⁵ ~ 1×10 ⁶ / мл (различные требования к плотности клеток различны), чтобы поддерживать нормальный рост клеток. Если требуется флакон, клеточная суспензия может быть собрана в центробежной трубке 1000 rpm, центрифуга 5 мин, отброшена в верхнюю очистку, после добавления 1 - 2 мл питательной жидкости после повторного взвешивания, клеточная суспензия делится на новую бутылку T25 в соотношении 1: 2, добавляется 6 - 8 мл новой питательной среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клетки, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 - 1: 4.

Биологическая безопасность

Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать в рамках вторичной станции биобезопасности, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитные маски при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.